PRUEBAS BIOQUIMICAS

MEDIO DE CULTIVO

 

PROPOSITO

 

INOCULACION

 

Tratamiento

Post

incubacion

RESULTADOS

 

POSITIVO

 

NEGATIVO

Agar de Almidón

Producción de la exoenzima Amilasa

24-48 h/ 37ºC

 

 

 

 

 


Yodo (2-3 gotas)

Área clara alrededor del cultivo

Color negro alrededor del cultivo

Agar con Gelatina

Producción de la exoenzima

Gelatinasa

24-48h/ 37ºC

Estocada hasta el fondo

 

 

 

 

 

 

 


Colocar en Nevera por 30 minutos

Licuefacción de la gelatina

Solidificación

Rojo Fenol Carbohidrato

ü Dextrosa

ü Mannitol

ü Lactosa

ü Sacarosa

Determinar si la bacteria puede utilizar, ese carbohidrato

24-48h/ 37ºC

“loop”

-

Amarillo (producción de ácidos, fermentación del carbohidrato)

Puede haber producción de gas

 

Rojo,  aumento del pH (producción de sustancias alcalinas por utilización de peptonas)

Agar de Tres azucares y Hierro (TSIA)

Ver el patrón de fermentación de          la bacteria

18-28h/ 37ºC

1-estocada

2

 

1

 
2-estriar

-

Utilización de glucosa

 


             Rojo

            

             Amarillo

 

Utilización de Lactosa y/o sucrosa

 

 


                  Am

         

                  Am

En ambos puede haber producción de gas y H2S (negro)

 

Utilización de peptonas

 

 

             Rojo

 

              Rojo

SIM

1. Determinar si la bacteria a través de Triptofanasas puede degradar el Triptófano a indol.

2. Determinar si hay producción de  H2S a partir de aminoácidos azufrados

3. Determinar si la bacteria es móvil.

24-48h/ 37ºC

Estocada hasta el fondo

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 


Para Indol: 2 a 3 gotas del reactivo de Kovac

Rojo (anillo) – presencia de indol (triptófano fue degradado).

 

 

Negro (precipitado), producción de H2S

 

 

 

Difuminación de la bacteria hacia los lados

 

 

 

Amarillo, la bacteria no puede degradar el triptófano

 

Medio de cultivo se queda igual.

 

 

 

La bacteria sólo crece en la línea de inoculación

 

Caldo MR-VP

Prueba de Rojo de Metilo

 

 

 

 

Prueba de Voges-Proskauer

 

Determinar habilidad de las bacterias para producir ácidos estables por fermentación de la glucosa

 

 

Determinar la capacidad de producir acetoina por fermentación de la glucosa

 

48h/ 37ºC

“loop”

 

 

 

 

 

 

 


48h/ 37ºC

“loop”

 

 

 

 

 

2 a 3 gotas de Rojo de Metilo (después de los siete días)

 

 

 

 

 

10 gotas de α naphtol

5 gotas KOH 40%

 

Rojo, presencia de ácidos, pH 4

 

 

 

 

 

 

Color rosa, presencia de acetoina

 

Amarillo,no producción de ácidos estables.

 

 

 

 

 

No desarrollo de color rosa, ausencia de acetoina

 

Simmons Citrate

Utilización del citrato como única fuente de carbono.

24-48h/ 37ºC

Estriar

 

 

 

 

 


-

 

Azul

 

Verde

Caldo de Urea

Determinar si la bacteria degrada la Urea

 

 

48h / 37ºC

“loop”

 

 

 

 

 


-

Rosa intenso

Medio permanece igual

Litmus Milk

Observar diferentes reacciones metabólicas que ocurren en la leche:

Fermentación

 

Reducción del Litmus

 

Coágulo:

a. Renina

 

 

b. Acido

 

 

 

 

 

Producción de

Gas

 

Proteólisis

 

 

 

Reacción Alcalina

24-48 h/ 37ºC

“loop”

 

 

 

 

 

 

 

 

 

-

 

-

 

 

 

-

 

 

-

 

 

 

 

 

-

 

 

-

 

 

 

-

 

 

 

 

 

 

 

Rosa

 

Blanco

 

 

 

Suave, se mueve si se inclina el tubo

Duro, se queda atascado en las paredes del tubo, si este se inclina

 

Coágulo roto

 

 

Violeta arriba y brown acuoso abajo

 

Violeta

 

 

 

 

 

 

Violeta

 

Violeta

 

 

 

No hay formación de coágulo

No hay formación de coágulo

 

 

 

Coágulo intacto

 

Violeta

 

 

 

Rosa

Agar de Nitrato

Determinar si la bacteria tiene la capacidad de reducir nitratos a nitritos

24-48 h/ 37ºC

 

 

 

 

 

 


1 gota de ácido sulfanílico

1 gota de α naphtilamina

Polvo de Zinc

 

Rojo

(sin echar el polvo de zinc)

 

Medio permanece igual (con el polvo de zinc cambia a rojo)

Catalasa : Agar Nutritivo

Determinar si la bacteria produce catalasa para degradar el H2O2.

1 gota de H2O2 a una colonia

Efervescencia

Permanece igual