BIOL 4426L

LABORATORIO DE PARASITOLOGIA ANIMAL

LAB. #3

AMEBAS

Instructor: Luis Bosques Rodríguez

Objetivos: Al concluir el laboratorio, los estudiantes estarán capacitados para:

a. identificar las diferentes estructuras morfológicas de las amebas.

b. identificar las diferentes étapas de su ciclo de vida.

c. diferenciar amebas patógenas de las comensales.

d. conocer y diferenciar los cuerpos cromatoideos de cada ameba.

SUBPHYLUM SARCODINA: AMEBAS

ORDEN AMOEBIDA

FAMILIA ENDAMOEBIDAE

· Son parásitos o comensales del sistema digestivo de artrópodos y vertebrados.

· El género y especie se diferencia en base al tamaño y estructura nuclear.

· Tres géneros contienen parásitos conocidos y comensales de seres humanos y animales domésticos: ENTAMOEBA, ENDOLIMAX, IODAMOEBA.

GENERO ENTAMOEBA

· Poseen un núcleo vesicular y tienen un ENDOSOMA (cariosoma) pequeño en o cerca del centro del núcleo.

· El citoplasma contiene una variedad de vacuolas alimentícias.

· Aparentemente no tienen aparatos o cuerpo de Golgi’s y mitocondrios lo cual los hace organismos primitivos.

· Cuerpos helicales pueden ser vistos distribuídos en el citoplasma de algunos trofozoítos amiboides. Estos cuerpos son de 0.3 μm a 1.0 μm de largos y contienen hasta 40 proteínas ribonucleares los cuales se cristalizan en cuerpos cromatoideo o barras cromatoidales, CHROMATOIDAL BARS seguido luego del enquistamiento. Dependiendo de la especie de los parásitos (amebas) son las formas de los cuerpos cromatoideos.

ENTAMOEBA HISTOLYTICA – Fue descubierta en el año 1873 por un asistente clínico D.F. Losch en St. Petersburg, Russia.

· Esta ameba es causante de disentería (AMEBIC DYSENTERY).

· Es la tercera causa de muerte por enfermedades parasítica en el mundo.

· En el intestino siempre hay amebas, pero esta es patógena.

· Carecen de mitocondrios y de aparatos de Golgi.

DISTRIBUCION: Global, sobre todo en el área tropical y subtropical.

HUESPED DEFINITIVO Y RESERVAS: Seres humanos, perros, cerdos y otros primates.

VECTORES: Moscas y cucarachas son vectores mecánicos. Estos organismos pueden trasladar los quiste de un lugar a otro a traves de heces fecales contaminadas.

CICLO DE VIDA:

1. CYST (Quiste) -Cuando los quistes son ingeridos por agua y comida contaminada son pasados a través del estómago protegidos por la pared del quiste. Estos pasan hacia el íleo donde ocurre rompimiento del quiste, el ambiente alcalino de esta región es favorable para este fenómeno.

2. METACYSTIC TROPHOZOITE (Trofozoíto metacístico) - Luego que el quiste se habre sale un organismo tetranucleado (cuatro núcleos) el cual pasa por una serie de mitósis produciendo ocho organismos uninucleados conocidos como trofozoítos metacísticos que pasan hacia el intestino grueso donde se alimentan, reproducen y crecen en trofozoítos.

3. TROPHOZOITE (Trofozoítos) -Reducción en perístalsis permiten al trofozoíto alojarse en el colon. Una gran cantidad de trofozoítos asegura una invación en el epitelio intestinal. Estos colon, el recto y también a veces la parte baja del intestino delgado de los humanos y otros primates. El trofozoíto prolifera mitóticamente (fisión binaria). Esta fase es la que invade tejidos cuando hidrolisan células y absorben el producto predigerido.

4. PRE –CYST (Pre – quiste) - Bajo condiciones adversas (al deshidratarse las heces fecales) los trofozoítos reduce su tamaño al expulsar su alimento y se condensa en una esfera.

5. CYST (Quiste) - El Pre –Cyst comienza a secretar una membrana hialina fuerte para formar el quiste. En esta étapa aparecen dentro del quiste los cuerpos cromatoideos. Los quiste son pasados en las heces fecales del infectado.

MORFOLOGIA

TROFOZOITO Figura 7.3 página 103 del Libro edición 2000

CARACTERISTICAS:

· Endoplasma granuloso

· Ectoplasma transparente

· Un núcleo esférico con un endosoma (cariosoma) central, fibrillas y cromatina periferal.

· Vacuolas con eritrocitos

· Nunca tienen barras cromatoideo.

· Bajan sólo en heces fecales que aún no se han deshidratado (diarrea) ya sea por disentería o por que el movimiento intestinal fue muy rápido y no se pudo enquistar.

EL QUISTE Figura 7.2 página 102 del libro

· El quiste contiene unas masas de RNA condensados llamadas CHROMATOIDAL BARS, (Cuerpos cromatoideos). En esta especie de ameba siempre son redondos en las puntas. Estas sólo se encuentran presentes en el quiste y nunca en el trofozoíto. La forma de estas estructuras son taxonómicamente importante.

· Tienen un núcleo con un endosoma central.

EL METAQUISTE (METACYST) figura 7.4 página 104 del libro

· A medida que va madurando el quiste pasa por una serie de divisiones mitóticas formando el METACYST o quiste maduro que contiene cuatro núcleos.

PATOGENICIDAD

· FASE INVASIVA - amebas invasivas producen úlceras en las paredes intestinales, estos alcanzan la submucosa y el sistema circulatorio. De ahí pueden viajar con la sangre a otros lugares en el cuerpo, como el hígado, pulmones y la piel. Esta ameba es única entre las amebas que infectan al ser humano en que hidrolisan tejidos en el húesped.

· LESION INTESTINAl - se desarrolla en el cecum, apéndice y el colon. Las amebas se aconglomeran en una úlcera destruyendo la mucosa intestinal. Estas amebas migran hasta la mucosa muscularis, luego pueden causar áreas huecas de necrosis. Amebas pueden seguir migrando hasta llegar al sistema circulatorio e invadir otros órganos causando infecciones secundarias.

· AMEBOMA - masa granulomatosa en las paredes del intestino que pueden obstruir el paso.

LESIONES SECUNDARIAS

· AMEBIASIS HEPATICA - resulta cuando los trofozoítos entran a tráves del portal hepático y viajan al hígado. El centro del absceso contienen líquido necrótico, la zona exterior consiste de trofozoítos atacando tejido hepático. El absceso puede romperse liberando debris y organismos a la cavidad del cuerpo.

· AMEBIASIS PULMONAL - ocurre por metastásis de la lesión hepática o de forma independiente infectando los pulmones.

SINTOMAS

· La enfermedad se desarrolla de forma lenta con períodos de diarrea, dolor, vómito y malestar general.

· Algunos pacientes toleran amebiasis intestinal por años sin síntomas de colitis pero estan pasando quistes.

· En la forma aguda se presenta dolor de cabeza, fiebre, dolor severo abdominal, diarrea prolongada. Un promedio de 15 a 20 descargas de diarrea por día que contienen mucosidad con sangre.

DIAGNOSTICO - Demostración de trofozoítos y quistes en las heces fecales.

La infección ocurre al ingerir el quiste en el agua o comida y relaciones sexuales vaginales y anales.

ENTAMOEBA COLI - es un comensal que nunca hidrolisa tejido en su huésped. Se alimentan de bacterias, otros protozoarios, levaduras y ocacionalmente de células de la sangre que estan accesibles a la ameba. El tecnólogo debe identificar correctamente esta ameba ya que los pacientes pueden ser sometidos a un tratamiento no necesarios. Casi siemre coexiste con Entamoeba hystolitica. El trofozoíto de ambos son difíciles de diferencial.

DISTRIBUCION – Mundial en algunas áreas del mundo alcanza el 100 porciento de la población.

HUESPED DEFINITIVO - El ser humano y otros primates.

ENFERMEDAD - Este parásito es un comensal, no causa ninguna enfermedad aun que esto indica la oportunidad de que exista la posibilidad de contagiarse o infectarse con Entamoeba hystolitica.

CICLO DE VIDA

1. CYST - son ingeridos en el agua y comida contaminada. Pasan a través del estómago protegidos por la pared del quiste hacia el íleo donde ocurre rompimiento del quiste de ocho núcleos.

2. METACYSTIC TROPHOZOITE - el quiste se rompe y sale un organismo de ocho núcleos el cual pasa una serie de divisiones mitóticas produciendo ocho organismos uninucleados que pasan al intestino grueso.

3. TROPHOZOITE - en el intestino grueso los metacystic trophozoite se alimentan, reproducen y crecen en trofozoítoa maduros.

4. PRE – CYST -bajo condiciones adversas los trofozoítos se reduce en tamaño y expulsan todo alimento de su interior.

5. CYST - el pre – cyst secreta una membrana o cubierta hialina. Aparecen las barras cromatoideos a medida que el quiste envejece los núcleos se dividen para formar ocho núcleos.

MORFOLOGIA

TROFOZOITO - Figura 7.7 página 108 del libro de parasitología

· Esta ameba es superficialmente idéntica a Entamoeba hystolitica, sólo se diferencian en su núcleo.

· El endosoma de esta ameba no se encuentra en el centro del núcleo mientras que en Entamoeba hystolitica se encuentra en el medio.

· QUISTE JOVEN

· Dentro del quiste encontramos una masas densas de barras cromatoideos de puntas filamentosas a diferencia de las barras cromatoideos de puntas redondas de los quistes de Entamoeba hystolitica.

METAQUISTE - figura 7.8 página 108

· El quiste madura y su núcleos pasa por unas serie de divisiones para formar ocho núcleos. Aveces se han visto hasta diesiseis núcleos.

PATOGENICIDAD

Como Entamoeba coli es un comensal no se requiere ningún tratamiento, pero infección con esta ameba indica la posibilidad de una infección de Entamoeba hystolitica.

GENERO ENDOLIMAX – viven en ambos vertebrados e invertebrados. Son amebas pequeñas con un núcleo vesicular. El endosoma es grande e irregular y son pegados a la membrana nuclear por filamentos acromáticos. Enquistamiento ocurre en su ciclo de vida.

ENDOLIMAX NANA – vive en el intestino grueso del ser humano en el nivel del cecum y se alimentan de bacterias. Es un comensal.

NOMBRE COMUN – “dwarf internal slug”

DISTRIBCION – Mundial

HUESPED DEFINITIVO – El ser humano y otros primates.

CICLO DE VIDA

1. TROFOZOITO - Vive en el colon del húesped donde se alimenta, reproduce y crece.

2. PRE – QUISTE - En condiciones adversa el trofozoito cambia su tamaño al expulsar su alimento.

3. QUISTE - El pre – quiste secreta una membrana protectora hialina. El quiste jóven presenta ocasionalmente barras cromatoideos. El quiste maduro, METACYST tiene cuatro núcleos. Estos pasan por las heces fecales.

4. METACYSTIC AMOEBA - un organismo tetranucleado sale a través de un poro del quiste en el intestino y su colonización comienza en la parte superior del intestino grueso. Pasa por una serie de divisiones citoplásmicas produciendo organismos uninucleados.

MORFOLOGIA

TROFOZOITO – figura 7.10 página 109

· El ectoplasma es una capa fina que está alrededor del endoplasma granular.

· Los pseudopodos son cortos y la ameba tiene movimientos cortos y lentos.

· El núcleo es pequeño y contiene un endosoma grande.

· Vacuolas de glucógenos estan presentes y vacuolas alimentarias contienen bacterias, células de plantas y debris.

QUISTE – figura 7.10 página 109

· Contienen vacuolas de glucógeno y ocacionalmente barras cromatoideos encorvadas.

METAQUISTE

· Contienen cuatros núcleos.

BIOLOGIA

Como todas las amebas formadoras de quistes que infectan al ser humano, el quiste maduro debe ser tragado. Aunque el protozoario no es patógeno su presencia indica la posibilidad de que ocurra una infección de organismod patógenos.

GENERO IODAMOEBA

IODAMOEBA BUETSCHLII – Este género sólo tiene una especie.

DISTRIBUCION - Mundial

HUESPED DEFINITIVO - infecta humanos, otros primates y cerdos.

Iodamoeba buetschlii es la ameba más común de los cerdos, el cual probablemente fue su huésped original.

CICLO DE VIDA

1. QUISTE – En las heces fecales de los seres humanos y cerdos.

2. METACYSTIC TROPHOZOITE (TROFOZOITO JOVEN) – Del quiste maduro uninuclear sale un organismo uninuclear el cual se mueve rápidamente.

3. TROFOZOITO – Se aloja en el intestino grueso alimentándose de bacterias y levaduras.

4. PRE – QUISTE - en condiciones adversas el trofozoito secreta una pared gruesa hialina.

MORFOLOGIA

TROFOZOITO – figura 7.11 página 110

· Pseudopodios cortos

· El ectoplasma no está claramente demarcado del endoplasma granular.

· El núcleo es relativamente grande y vesicular.

· Endosoma grande rodeado por granulos entreel núcleo y la membrana nuclear.

· Fibras acromáticas se extiende entre el endosoma y la membrana nuclear.

· Vacuolas alimentícias generalmente contienen bacterias y levaduras.

EL QUISTE – figura 7.12 página 110

· El quiste es oblongado o ovalado.

· El quiste maduro generalmente tiene un sólo núcleo.

· Una vacuola grande tiñen con yodo de ahí su nombre Iodamoeba buetschlii.

BIOLOGIA

Iodamoeba buetschlii vive en el intestino grueso donde se alimentan de la flora intestinal. La infección se transmite por contaminación con quistes maduros. Es posible que los humanos se infectan con las heces fecales de cerdos y de humanos.