Universidad de Puerto Rico

Recinto Universitario de Mayagüez

Departamento de Biología

Segundo examen del curso de genética de bacterias (BIOL 5758)

Conteste las siguientes preguntas, sea claro y específico, no más de una página de contestación por pregunta y éstas deben prepararse usando su procesador

de palabras favorito. La reunión grupal para discutir las preguntas es recomendada. Al momento de contestarlas, hágalo de manera individual.

I. Utilizando el siguiente plásmido, conteste las preguntas a continuación. Presuma que los genes incluidos contienen todos los ORF’s referentes a esa

función (e.g. el gen mob contiene todos los ORF’s asociados con mob). Lugares de restricción han sido incluidos. La bacteria está modificada de tal manera que

“white-blue screening” pueden llevarse a cabo. De una breve explicación luego de cada respuesta.

1. ¿Es pCelis autotransmisible? (5 pts)

2. ¿La bacteria que posea pCelis, será transformable naturalmente? (5 pts)

3. ¿Qué le ocurrirá a la bacteria que tenga este plásmido si es crecida en sacarosa? (5 pts)

4. ¿Qué le ocurrirá a la bacteria que tenga este plásmido si es crecido en cloranfenicol? (5 pts)

5. Un científico amigo suyo le pide envíe su pCelis para clonar el gen lux. Sugiérale dos estrategias para clonar el gen de interés y cómo puede

verficar su resultado? (15 pts).

6. ¿Qué mecanismo debería utilizar la bacteria de donde se aisló este plásmido para asegurarse que cada célula hija posee al menos una copia

del mismo? (5 pts)

7. ¿Cómo afectaría una deleción en sacB los genes tra? (5 pts)

8. ¿Qúe podría ocurrir a una célula de donde se aisló pCelis si luego de ser curada para este plásmido se le inserta el mismo luego de:? (25 pts)

a. Ser tratado con UV

b. Ser tratado con ácido nitroso

c. Si a sacB le ocurre una mutación sinónima

d. Si ocurre una mutación ámbar en el último codón de cat

e. Si un transposón se ha insertado en a-lacZ

9. El Dr. Berstein insertó en pCelis un gen que permite a la bacteria producir una bacteriocina, sirviendo este gen para hacer al organismo

más competitivo en el medio ambiente. El doctor inactivó este gen mediante mutaciones de punto, lo clonó en pCelis, lo tranformó en la

bacteria y luego realizó estudios de competencia en el suelo. El doctor encontró que todas las bacterias mutantes recuperadas del suelo luego del

experimento producen la bacteriocina y al secuenciar el gen solo se encontraron las mutaciones creadas anteriormente. ¿Cómo explicaría

este fenómeno y diseñe un experimento para probarlo? (15 pts).